Vắc-xin (Vaccine) là chế phẩm có tính kháng nguyên dùng để tạo miễn dịch đặc hiệu chủ động, nhằm tăng sức đề kháng của cơ thể đối với một số tác nhân gây bệnh cụ thể. Vaccine được thử nghiệm lần đầu tiên bởi Edward Jenner vào năm 1976 khi ông thử gây nhiễm bệnh đậu mùa (đậu bò) cho những nông dân vắt sữa bò và quan sát thấy họ trở nên miễn nhiễm sau khi khỏi bệnh. Ứng dụng vaccine trải dài từ phòng chống những bệnh cho người như bệnh dại, cúm, viêm gan B cho tới những bệnh trên động vật và thủy sản như lở mồm long móng, các bệnh gây bởi virus Vibrio, Lactococcus ở cá, tôm, v.v. Với sự phát triển của công nghệ sinh học, vaccine không chỉ còn tồn tại ở dạng vi sinh vật bất hoạt mà đã trở nên an toàn hơn khi hầu hết các loại vaccine ngày nay được sản xuất sử dụng công nghệ gen. DNA tái tổ hợp chứa đoạn gen liên quan đến bệnh được đưa vào trong vi khuẩn thuần tính hoặc nấm men, sau khi nuôi cấy, nhân sinh khối, kháng nguyên sẽ được tách ra khỏi tế bào chủ (vi khuẩn, nấm men, các loại tế bào động vật như CHO) và tinh khiết để tạo vaccine. Để kiểm tra chất lượng một cách chặt chẽ và nâng cao tính an toàn, các cơ sở sản xuất vaccine hoặc những nơi kiểm nghiệm vaccine sẽ phải đánh giá, định lượng DNA tế bào chủ trong thành phẩm. Quy trình này cũng áp dụng tương tự đối với các chế phẩm dược sinh học khác. Tuy nhiên, khó khăn gặp phải là khi lượng DNA của tế bào chủ quá ít, thì giải pháp cần thực hiện là gì để phát hiện ra được mục tiêu? Câu trả lời nằm ở kỹ thuật PCR thế hệ mới nhất mang tên: PCR vi giọt kỹ thuật số - Droplet digital PCR (ddPCR).
Công ty TNHH Khoa Học Hợp Nhất xin hân hạnh giới thiệu đến Quý khách hàng Quy trình định lượng DNA tế bào chủ trong Vaccine, Dược sinh học bằng PCR Vi giọt Kỹ thuật số (ddPCR™).
Bước 1: Chuẩn bị mẫu sinh phẩm
- Pha loãng sinh phẩm ~100 lần và cho trực tiếp vào phản ứng
- Nồng độ IgG tối đa không qua tách chiết: 0.5 mg/ml
- Sử dụng 5 mM DTT hỗ trợ khi IgG vượt quá 0.05 mg/ml
- Tách chiết DNA nếu lượng protein quá 1.0 mg/ml, muối cao, pH thấp
|
Bước 2: Chuẩn bị phản ứng định lượng dư lượng DNA tế bào chủ
Kit ddPCR™ định lượng dư lượng DNA tế bào chủ
ddPCR™ CHO Residual DNA Quantification Kit (Bio-Rad)
- Không cần tách chiết DNA
- Chịu được chất ức chế tốt hơn so với Real-time PCR
- Không cần dựng đường chuẩn để định lượng DNA
- Phát hiện được DNA chủ bị phân rã
- Quy trình đơn giản, công suất cao
|
Xem thêm ...
ddPCR™ E. coli Residual DNA Quantification Kit (Bio-Rad)
- Không cần tách chiết DNA
- Chịu được chất ức chế tốt hơn so với Real-time PCR
- Không cần dựng đường chuẩn để định lượng DNA
- Phát hiện được DNA chủ bị phân rã
- Quy trình đơn giản, công suất cao
|
Xem thêm ...
Bước 2: Chay phản ứng theo quy trình PCR vi giọt kỹ thuật số (ddPCR™) (Tạo giọt - Nhân bản - Đọc giọt)
QX200™ Droplet DigitalTM PCR System (Bio-Rad)
- Quy trình có độ chính xác và độ lặp lại cao
- Độ nhạy cao (hơn 10-100 lần so với ddPCR)
- Định lượng tuyệt đối gen mục tiêu không qua
- đường chuẩn
- Hệ thống mở, cho phép người dùng tự phát triển
- thử nghiệm
|
Xem thêm ...
Bước 3: Phân tích kết quả ddPCR bằng phần mềm
QuantaSoft™ Software
- Hỗ trợ phân tích kết quả dễ dàng, nhanh chóng
- Tự động cung cấp kết quả định lượng tuyệt đối
- Cung cấp kèm theo máy và cập nhật miễn phí
|
Xem thêm ...