Đặc điểm và Lợi ích

• Độ nhạy và độ tái lặp cao cho phản ứng Multiplex 5 mục tiêu - Phù hợp với hầu hết các loại mẫu, giúp giảm chi phí hóa chất
• Bền ở nhiệt độ phòng trong vòng 24 giờ - Tiện lợi trong chuẩn bị thí nghiệm và phù hợp với các hệ thống tự động
• Đóng gói trong 1 ống - Giảm thời gian và sai số trong thao tác
• Công thức đậm đặc 4x - Tối đa lượng mẫu RNA sử dụng, giúp tăng độ nhạy
• Chịu được một số chất ức phản ứng PCR thường gặp - Tương thích với dịch ly giải tế bào và mẫu RNA chất lượng thấp

Hoạt động hiệu quả với phản ứng Multiplex 5 mục tiêu

Năm trình tự RNA mục tiêu khác nhau được phân tích trong cùng một phản ứng sử dụng Supermix Reliance One-Step Multiplex trên máy Real-time PCR CFX96 Touch. Nồng độ từ 1 pg đến 1 ug. 

Phát hiện DNA và RNA cùng lúc trong cùng một phản ứng

Một thí nghiệm được thiết kế để kiểm tra các mẫu chứa 3 bộ gen của virus, hai ở dạng RNA - Zika (ZIKV) và Chikungunya (CHIKV) - và phiên bản DNA của Virus sốt xuất huyết (DENV), cùng với RNA chứng dương nội sinh và DNA chứng dương từ bộ gen người (gDNA). Các mục tiêu virus đã được thử nghiệm ở năm độ pha loãng khác nhau, trong khi các chứng dương được giữ không đổi. Số lượng bản sao cho các mục tiêu RNA của virus được xác định bằng Droplet Digital RT-PCR và được pha loãng thành một bản sao hoặc ít hơn cho mỗi phản ứng trong chuỗi pha loãng thấp nhất của chúng (Bảng 1). Hai đĩa giống nhau, mỗi đĩa chứa 10 bản sao  của mỗi RNA mục tiêu được chuẩn bị; một đĩa được phân tích ngay lập tức (thời gian = 0 giờ) trong khi đĩa thứ hai được bảo quản ở nhiệt độ phòng (25 ° C) và được phân tích vào ngày hôm sau (thời gian = 24 giờ). Supermix Reliance Superm-One Multiplex đã phát hiện hiệu quả cả hai mục tiêu RNA và DNA với hiệu quả vượt trội và độ nhạy ở mức 1 bản sao duy nhất ở cả hai thời điểm (Hình 1.)

Thành phần supermix

• Hỗn hợp đã được tối ưu hóa bao gồm enzyme phiên mã ngược Reliance và một số enzyme DNA polymerase hiệu năng cao (bao gồm DNA polymerase dung hợp với protein Sso7d)
• Dung dịch đệm 4X chứa dNTP, chất ức chết RNase, và các thành phần tối ưu hóa phản ứng khác
• Các chất ổn định phản ứng
• Chất huỳnh quang nền phù hợp với nhiều dòng máy (có bản quyền)

Ứng dụng

• Khảo sát biểu hiện gen
• Phát hiện tác nhân gây bệnh (virus RNA, virus DNA, vi khuẩn, vi nấm)
• Nghiên cứu về bệnh
• Sàng lọc công suất cao (các phân tử nhỏ, phát triển thuốc, thử nghiệm liều lượng, sàng lọc CRISPR, và nghiên cứu độc tính)

Tương thích với nhiều hệ thống Real-time PCR khác nhau

Bên cạnh các dòng máy CFX của Bio-Rad, supermix Reliance One-Step Multiplex RT-qPCR còn tương thích với nhiều dòng máy Real-time PCR khác trên thị trường.